技術(shù)原理
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細(xì)胞和組織獲取系統(tǒng)(CTAS)——基于毛細(xì)管的真空脈沖輔助技術(shù)
UnipicK+單細(xì)胞采集和組織顯微切割儀,在已獲專利保護(hù)的“細(xì)胞和組織獲取系統(tǒng)(CTAS)”基礎(chǔ)上,采用基于毛細(xì)管的真空脈沖輔助技術(shù)——以真空脈沖負(fù)壓為動(dòng)力,玻璃毛細(xì)管為工具,在顯微鏡直接觀察下,根據(jù)細(xì)胞形態(tài)、熒光標(biāo)記、解剖學(xué)特征或特定位置,從貼壁、懸浮和3D立體培養(yǎng)的細(xì)胞中快速精確地采集單細(xì)胞或細(xì)胞克隆,或者從組織切片中顯微切割特異性組織區(qū)域。
UnipicK+的主要組成部件包括:頂部帶有可調(diào)節(jié)LED環(huán)形燈的操作頭,真空管路和電纜,帶有真空模塊的控制箱(配備數(shù)字化的操作界面),以及可將設(shè)備安裝于大多數(shù)倒置顯微鏡上的通用型支架。使用時(shí),在取樣器頭部安裝即用型一次性毛細(xì)管單元(DCU),通過操控DCU做垂直運(yùn)動(dòng),為校準(zhǔn)和采樣提供精確定位;取樣器頭部的LED環(huán)形燈可用于照亮組織樣本;真空模塊包含電子控制裝置和帶氣動(dòng)管道的真空泵;真空強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間以及LED燈強(qiáng)度均可按實(shí)際操作需要進(jìn)行調(diào)節(jié)。
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產(chǎn)品應(yīng)用/特點(diǎn)
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UnipicK+應(yīng)用
·單細(xì)胞采集
UnipicK+可從細(xì)胞培養(yǎng)皿/板或組織切片中采集單個(gè)細(xì)胞,目前已在幾乎所有類型的貼壁、懸浮以及3D培養(yǎng)的細(xì)胞中證明了此種采集方法的可行性,包括一些處理起來十分困難的樣品,如原代細(xì)胞,或取自新鮮冷凍和蔗糖處理的復(fù)合組織(如腦)的單個(gè)細(xì)胞。
·組織顯微切割
UnipicK+適用于從復(fù)雜異質(zhì)性組織(如腦)中采集得到特定區(qū)域的組織,即對(duì)目標(biāo)組織區(qū)域進(jìn)行顯微切割操作。
·單細(xì)胞克隆與測序分析
UnipicK+配備有自動(dòng)分配系統(tǒng),與下游單細(xì)胞分析及下一代測序操作兼容,可在采集完成后將樣本分配到培養(yǎng)板、PCR管、8排管、48孔板中,方便進(jìn)行后續(xù)的單細(xì)胞克隆擴(kuò)增、提取核酸進(jìn)行PCR、微陣列和測序分析等。
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UnipicK+應(yīng)用舉例
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UnipicK+適用的研究領(lǐng)域:
神經(jīng)科學(xué),干細(xì)胞生物學(xué)和單細(xì)胞分析,癌癥生物學(xué)等領(lǐng)域。
UnipicK+產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 數(shù)字化的操作界面,簡單易懂,無須復(fù)雜的培訓(xùn)即可上手。
2. 在顯微鏡下對(duì)組織切片的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行有效切割,或從標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿中生長的任何貼壁培養(yǎng)物中收集和沉積單個(gè)細(xì)胞,體積小至15 nl。
3. 與各種下游單細(xì)胞分析和下一代測序操作兼容,方便提取用于下游組學(xué)研究的高質(zhì)量RNA和蛋白質(zhì)。
4. 采集過程不涉及輻射、激光、熱和化學(xué)處理,對(duì)細(xì)胞活性的影響較小,因此收集后的細(xì)胞具有較高的存活能力,可以用于再培養(yǎng);對(duì)細(xì)胞內(nèi)大分子活性和完整性影響也較小,適合下游單細(xì)胞測序等分析。
5. 適合于多種倒置顯微鏡。
6. 性價(jià)比高,因真空負(fù)壓輔助技術(shù)成本低,僅占激光輔助的顯微切割儀成本的一小部分。
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耗材
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一次性毛細(xì)管單元(DCU):
·由粗(K)壁或薄(N)壁硼硅酸鹽毛細(xì)管制成;無菌。
·直徑范圍10-100μm,使用范圍從單細(xì)胞采集、培養(yǎng)細(xì)胞克隆采集、到特定組織區(qū)域的顯微切割。
·DCU的內(nèi)徑大致對(duì)應(yīng)于采集區(qū)域的大小,采集區(qū)域可能會(huì)由于所設(shè)定的真空持續(xù)時(shí)間和強(qiáng)度而有所不同。
·每包裝6個(gè)。
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附件:
通用型支架:
將UnipicK+與幾乎任何類型的倒置顯微鏡連接,從單細(xì)胞培養(yǎng)到更先進(jìn)的系統(tǒng),使實(shí)驗(yàn)工作更具靈活性。
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通用型載物臺(tái)適配器:
實(shí)現(xiàn)從多種培養(yǎng)裝置中采集和分配樣本:切片到切片,板到板,切片到板,切片/板到PCR管/8管條/48孔板。
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產(chǎn)品規(guī)格
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界面
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數(shù)字化操作
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壓力泵最大正壓
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5 PSI(≈258.6mmHg / 34.5 kPa)
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真空泵最大負(fù)壓
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10 PSI(≈517.1mmHg / 69.0 kPa)
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壓力持續(xù)時(shí)間
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0.1 ~ 1.0 s
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樣本兼容性
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貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞,3D培養(yǎng)物,新鮮活組織,新鮮冷凍組織,蔗糖處理組織和固定過的組織等
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樣本分辨率
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培養(yǎng)的單細(xì)胞和內(nèi)徑20μm的組織切片
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適用組織切片厚度范圍
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5-300μm
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細(xì)胞存活率
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可達(dá)95%(數(shù)據(jù)來自于對(duì)3T3、CHO以及SH-SY5Y細(xì)胞系的評(píng)估)
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一次性毛細(xì)管單元(DCU)規(guī)格
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10 ~ 100 μm
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線性馬達(dá)單次位移距離
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1.5 μm
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線性馬達(dá)最大位移距離
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23.3 mm
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線性馬達(dá)最大位移速度
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0.30 mm/s
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樣本載體
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25mm載玻片;
35mm和50mm培養(yǎng)皿;
96/24/12/6孔培養(yǎng)板;
48孔PCR管;
微流芯片等
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分配通量
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可達(dá)48個(gè)樣本
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采集體積
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DCU20μm:10nl- 2.5μl
DCU30μm:35nl- 3.0μl
DCU40μm:70nl- 5.0μl
(由標(biāo)準(zhǔn)DMEM培養(yǎng)基計(jì)算得出;實(shí)際采集量取決于DCU直徑和樣本粘度)
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采集速度
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組織切片 - 可達(dá)12個(gè)細(xì)胞/min
細(xì)胞培養(yǎng)物 - 可達(dá)25個(gè)細(xì)胞/min
(預(yù)估的采集速度僅作為參考值,實(shí)際速度可能與用戶/應(yīng)用相關(guān))
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顯微鏡兼容性
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可兼容多種型號(hào)的倒置顯微鏡
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參考文獻(xiàn)
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